如何更好地满足HPLC方法开发中的“既要又要还要”?
在HPLC方法开发中,往往首先要考虑分离效果,以确保方法的准确性和稳定性;在这个基础上,还要考虑方法的时间尽量短,以提高检测的效率;同时方法要有好的仪器兼容性,特别是不能背压太高,以方便在不同仪器平台上的方法转移。可以说,评价一个足够好的HPLC分析方法就是“既要又要还要”,但是这三者并非“不可能三角”。今天我们给大家介绍一类色谱柱,可以协助我们更好地满足HPLC方法开发中的这些要求。
这类色谱柱就是核壳柱,也就是填充了核壳颗粒(core-shell particle)填料的色谱柱,这类颗粒也被称为表面多孔颗粒(superficially porous particle,SPP)或者实心核颗粒(fused-core particle)。其结构示意图如图1所示:
图1 Aurashell系列核壳硅胶示意图
使用这类颗粒作为填充物时,可以让色谱柱获得几方面的优势:
1. 更快的出峰速度,从而节约分析时间和溶剂;
2. 独特的材料设计让色谱柱获得更高的柱效和灵敏度,从而获得更好的分离效果;
3. 2.7μm的填料可以获得和UPLC颗粒(亚2μm)效果,但是压力更低,可以兼容绝大部分的仪器平台。对比数据显示,Aurashell系列具有比大部分同类竞品更低的背压。
以下是核壳的Aurashell系列和全多孔的Horizon系列的测试数据对比:
图2 Aurashell和Horizon系列的数据对比
同时,我们的Aurashell系列具有非常齐全的固定相设计,以实现在高效的基础上实现选择性的互补性,以应对更复杂的分离难题。Aurashell一共有14款固定相,覆盖了3种填料粒径和3种填料孔径。
图3 Aurashell系列固定相一览
星谱科技在开发方法的时候也是一直坚持对“既要又要还要”的极致追求,因此Aurashell在很多的方法开发中发挥了重要的作用,如图4所示,我们最近在一个异构体的分离项目中,在使用全多孔的Horizon C8成功实现了分离目标后,使用核壳技术的Aurashell C8,获得了更高的分离度和灵敏度,同时节约了约50%的时间。
图4 一个异构体分离项目中两种色谱柱的效果对比
我们还有一个经典的应用是人参类的含量测定,原药典方法的分析时间为100min,当使用核壳类的色谱柱时,可以把时间缩短至40min以内(参见应用Aurashell核壳色谱柱快速实现人参皂苷含量测定)。
图5 人参皂苷含量测定中两种色谱柱的效果对比
另外,基于星谱实验室这几年的数据统计,核壳色谱柱在异构体分离中的成功率也明显高于全多孔,这方面更多的理论和数据分享将在以后的推文和直播中分享。
全文总结
核壳色谱柱具有节约分析时间和溶剂、更高的柱效和灵敏度以及相比UPLC颗粒更低背压的优点,有助于我们实现更高质量的HPLC分析方法开发,推荐作为方法开发的工具。欢迎关注我们,了解学习更多色谱知识。