Artchrom Ca钙离子交换柱

Artchrom Ca色谱柱为磺化交联的苯乙烯/二乙烯基苯（PS/DVB）共聚物为填料的强阳离子钙型色谱柱（归属于USP L19）是专门为糖类、醇类的高效分离而设计。填料的粒径分布极窄，从而确保高柱效和好的分离效果。

一、色谱柱参数

二、使用步骤

1．用两通取代色谱柱连接仪器，用过滤好的超纯水冲洗仪器50 mL；

2．用分析流动相冲洗仪器50 mL，停泵；

3．将 Artchrom Ca色谱柱连接在 HPLC系统上。

为了保证新色谱柱及长时间未使用的色谱柱能在分析使用之前得到足够的钙离子的平衡，我们推荐使用以下程序：

1）用流动相冲洗色谱柱90 min；

2）设置流速在 0.2-0.3 mL/min直到柱温达到设定值；

3)  在柱温达到设定值时，将流速增至分析所需流速，流速变化以0.1 mL/min为增量，待柱压稳定后再继续增加流速，增加流速时需要保证压力不超过2000 psi。

三、流动相的要求

1. Artchrom Ca由钙基树脂填装而成，因此氢离子和其它离子可能会取代钙离子，同时某些糖类，尤其是蔗糖等会与钙离子作用而造成钙离子的流失，因此推荐在流动相中加入一定量的钙离子来保持平衡和防止与样品的置换。推荐的流动相为去离子的无菌水，含EDTA钙盐约0.0001 M（50 mg/L）。

2. 使用的水应为经过脱气处理的超纯水（电阻率大于2兆欧），水中应不含多价离子，尤其是过渡金属元素。使用前需用0.45 μm或更小孔径的滤膜除去其中可能含有的细菌和其它颗粒物。

3. 如果系统需要连续使用超过一天，请将流动相置于锥形瓶中，放在搅拌器/电炉上，用铝箔封上瓶口以减小蒸发，用前将流动相加热至沸点并保持5分钟，使用时保持温度70-90 ℃。这个操作能够保证气体（尤其是CO2）不再重新溶解在流动相中，同时也能防止微生物的滋生。

四、注意事项

1. 通常推荐压力不超过2000 psi；

2. 最大流速不超过2 mL/min（70 ℃） ；

3. 流动相中有机相的最大含量为5%（V/V），样品中少量的乙腈、乙醇、甲醇和异丙醇不会影响色谱柱的性能；

4. 色谱柱的温度不超过 95 ℃。通常高温会带来高的分离度，但在 90-95 ℃之间几乎没有变化，70 ℃以下对于许多糖的异构体的分离来说不能提供足够的分离度，对于乙醇的定量，柱温应在75 ℃；

5. 柱温的快速变化基本不会对色谱柱带来不利影响，但是如果柱温在 60 ℃以下，由于水的黏度较大，需要注意压力是否在安全范围；

6. 定期反向冲洗色谱柱（如每使用5 L流动相之后），这将会有效地延长色谱柱的寿命；

7. 流速变化应当缓慢进行，建议改变流速时以0.1 mL/min为增量，直到压力稳定后再继续增加流速。

五、保存条件和重新启动的注意事项

1. 保存：用超纯水冲洗色谱柱10个柱体积后关掉柱温箱，待柱温冷却到室温后停泵。当柱子冷却后从系统中移出，拧紧色谱柱堵头以防止色谱柱中的溶剂挥发，最好将色谱柱置于冰箱的冷藏区（5℃）保存，以降低可能的细菌繁殖和溶剂挥发；如长期不用，可定期取出用超纯水冲洗后保存。

2. 启动：当整夜停机后开启系统时，请先打开柱温箱，流动相的流速不要超过 0.2 mL/min，保持此流速至少二十分钟直到达到色谱柱工作所需温度，然后再按照目标的分析条件来设置。

六、故障检查

Artchrom Ca色谱柱是以树脂的膨胀形态紧密装填的，如果样品进行了很好的前处理，那么大部分产生的问题都和树脂填料有关，比如压力的突然增加时，树脂填料可能被冲到柱子的出口端筛板处。压力的增加可能是柱头或者保护装置中拦截了颗粒物导致堵塞，如果不是此问题，那么很可能是树脂部分堵塞于出口端的筛板处，此时需要停泵，然后将色谱柱反接，再将泵流速设定为 0.1 mL/min，当达到工作时的温度后再提高至工作时的流速进行冲洗。

 七、柱子的再生步骤

Artchrom Ca色谱柱的再生频率和样品有关，如果分析物为天然物样品（尤其是含有过渡金属元素或有机酸的样品），则更需要经常对色谱柱进行再生，因为它们会与柱子发生置换反应而导致Ca离子的流失。可以用蔗糖来测试柱子的置换情况，如果蔗糖的峰出现明显拖尾，那么柱子需要做以下处理：

配制 500 mL的再生溶液（Ca EDTA 500 mg/L），在 90 ℃下以 0.5 mL/min的流速反接色谱柱冲洗过夜，再生之后以色谱柱标注的方向使用。